Existem muitas maneiras de medir o crescimento bacteriano, e uma delas é mais complicada do que a outra. Embora às vezes a consistência da medição deva ser ignorada, a maneira mais fácil é o suficiente para medir o crescimento bacteriano com precisão, por isso é freqüentemente usada. Os métodos mais comumente usados são monitoramento e contagem de bactérias, medição de massa seca ou úmida e medição dos níveis de turbidez / turbidez. O laboratório da sua escola deve ter as ferramentas e equipamentos necessários para realizar pelo menos um desses experimentos.
Etapa
Método 1 de 3: Monitoramento de bactérias vivas
Etapa 1. Prepare os ingredientes
Existem muitas ferramentas especiais que precisam ser preparadas e podem não estar disponíveis em um laboratório de biologia. Prepare todo o equipamento e recipientes antes de executar o experimento para que não haja problemas durante o processo. Você precisará conhecer cada ingrediente usado imediatamente e os termos básicos deste experimento.
- Prepare a câmara de contagem. Possui uma câmara embutida, vidro de microscópio e microscópio, portanto é fácil de configurar e usar. Você pode comprá-lo em um laboratório ou loja de materiais escolares. Essa ferramenta deve ter instruções que o orientem em todo o processo.
- Prepare um copo para servir ou espalhar. Ambos os recipientes permitem monitorar as bactérias dentro.
- Cultura é um termo usado para descrever o crescimento de organismos em um experimento.
- O caldo é um meio líquido no qual a cultura cresce.
Etapa 2. Use o método de espalhar ou espalhar pratos
Você também pode colocar as bactérias diretamente no prato para visualização usando um microscópio. Despeje a cultura em um pires e coloque-o sob o microscópio. Monitore o número de células bacterianas presentes.
Etapa 3. Certifique-se de que a dose de concentração está correta
Se houver muitos, as bactérias se acumulam e você pode calcular mal. Diluir a cultura misturando mais caldo. Se houver poucos, os resultados do cálculo não serão precisos. Coe o caldo usando um sistema de filtração.
Etapa 4. Conte as bactérias
A última etapa é contar as bactérias uma a uma. Olhe pela lente de aumento na câmara de contagem e anote o número de bactérias que você vê. Compare os resultados com os resultados de outros testes.
Método 2 de 3: Medindo Massa Seca e Úmida
Etapa 1. Certifique-se de ter o equipamento certo
Este método usa equipamentos caros e muito tempo. Se o seu laboratório não tiver o equipamento de que você precisa, é uma boa ideia usar outro método. No entanto, se o seu laboratório estiver suficientemente bem equipado, recomendamos este método, pois fornece resultados mais consistentes. Neste método, você precisará de:
- Forno de convecção por gravidade hidráulica
- Recipiente de pesagem feito de alumínio
- Um conjunto de frascos (frascos de laboratório)
- Máquina centrífuga (centrífuga) ou sistema de filtração de laboratório
Etapa 2. Certifique-se de que a cultura está no frasco
Adicione a cultura à abóbora. Nesta fase, a cultura deverá ser em caldo, embora posteriormente seja novamente separada.
Etapa 3. Seque o recipiente de pesagem de alumínio na estufa do laboratório
Em vez disso, você pode usar uma membrana de filtro de acetato de celulose com um diâmetro de 47 mm e um tamanho de poro de 0,45 µm. Qualquer que seja o recipiente de pesagem que você usar, pese-o, pois será necessário deduzi-lo posteriormente, ao pesar as células bacterianas.
Etapa 4. Agite a cultura no frasco até que esteja uniformemente misturada
A célula afundará naturalmente devido à gravidade e precisará ser agitada para se espalhar uniformemente no frasco. Dessa forma, você pode ter mais amostras.
Etapa 5. Use uma centrífuga para separar as células bacterianas do caldo
Esta ferramenta gira o frasco e equilibra rapidamente para que drene o caldo e deixe a cultura no frasco.
Passo 6. Raspe a pasta da abóbora e coloque em um recipiente de pesagem
Jogue fora o caldo porque você não precisa mais dele. No entanto, não se livre da abóbora ainda porque ela ainda será usada.
Etapa 7. Enxágue a máquina centrífuga e despeje a água de enxágue no recipiente
Solte a água de enxágue do frasco sobre as células bacterianas para obter o peso úmido.
Etapa 8. Encontre o peso seco
Para medir o peso seco, coloque o recipiente na estufa e seque a 100ºC por 6-24 horas de acordo com as instruções da estufa e / ou balança utilizada. Certifique-se de que a temperatura não esteja muito alta para que as bactérias não queimem. Pese as bactérias ao terminar e não se esqueça de reduzir o resultado pelo peso do recipiente de pesagem.
Método 3 de 3: Medindo Turbidez
Etapa 1. Prepare o equipamento necessário
Você precisará de uma fonte de luz e de um espectrofotômetro. Ambos podem ser obtidos em lojas de materiais de laboratório. O espectrofotômetro deve ter instruções que irão guiá-lo no uso do instrumento de acordo com o modelo que você possui. O preço do espectrofotômetro é bastante acessível e fácil de usar, de modo que pode se tornar um dos métodos mais comumente usados para medir o crescimento bacteriano.
Etapa 2. Ilumine a amostra
De acordo com o termo de Layman, turbidez é o nível de turbidez de uma amostra. Você precisa obter o número de medição de turbidez, que é medido em NTU (Unidade de turbidez nefelométrica). Esta ferramenta precisa ser calibrada antes que possa medir a amostra com precisão.
Etapa 3. Registre os resultados
A turbidez é afetada pelo número de bactérias na amostra. O espectrofotômetro também informará a porcentagem de transmissão (% T). Este valor aumentará se a turbidez diminuir. Compare os resultados com os resultados de outros testes para medir o crescimento bacteriano.
Aviso
- Como você está lidando com uma colônia bacteriana, tome precauções ao usar equipamentos de segurança, como óculos e luvas de segurança. Também é uma boa ideia usar uma máscara, especialmente se você não souber o tipo de bactéria que está sendo estudada.
- Tome precauções antes de manusear qualquer tipo de bactéria, mesmo as inofensivas. Certifique-se de que todas as feridas abertas em seu corpo estão completamente cobertas antes de começar.
