Pipetas são equipamentos de laboratório usados para medir e transferir volumes muito pequenos de líquidos. A precisão nas medições da pipeta é muito importante porque as diferenças no volume perdido pela pipeta podem afetar os resultados experimentais. Para garantir a precisão, é importante verificar a calibração da pipeta a cada poucos meses. O processo de calibração é útil para verificar se este equipamento está pingando líquido no volume correto, para que sejam feitos reparos, se necessário.
Etapa
Parte 1 de 2: Verificação da calibração
Etapa 1. Reúna os materiais necessários
Para verificar a calibração da pipeta, é necessária uma pipeta, ponteiras, água destilada, copo, termômetro, balança e copo de pesagem. A balança usada deve estar na escala de microgramas para calibrar a micropipeta com um valor máximo de 1 L.
- Você não precisará de mais de 5 mL de água. Encha o copo com água.
- Certifique-se de que a ponta da pipeta está correta e se encaixa perfeitamente na pipeta.
Etapa 2. Meça a temperatura da água destilada
Coloque o termômetro na água e deixe descansar por pelo menos um minuto. Se a linha vermelha do termômetro ainda estiver se movendo, espere mais um minuto. Após um minuto, registre a temperatura. Pegue o termômetro e seque-o quando terminar.
A temperatura da água é importante saber, pois será utilizada para cálculos realizados para verificação da calibração
Etapa 3. Coloque o copo de pesagem na balança e zere a balança
O ideal é que a balança utilizada tenha uma porta e um espaço isolado no interior. Coloque o copo de pesagem na câmara da balança e feche a porta. Se sua balança não tiver cubículo e porta, basta colocar um copo de pesagem na balança. Pressione o botão “Zero” ou “Tara” e espere que a balança mostre zero.
Zerar a balança reduz o peso do copo de plástico e permite que você pese apenas o peso da substância colocada no copo
Etapa 4. Prepare a pipeta para calibração
Limpe a pipeta com etanol antes de iniciar e certifique-se de que nada está obstruindo a ponta da pipeta. Coloque a ponta da pipeta correta na ponta da pipeta e determine o volume a ser testado.
Para calibração, teste os menores e maiores volumes que podem ser removidos da pipeta
Etapa 5. Lave a ponta da pipeta antes de calibrá-la
Pressione o botão até o primeiro limite e mergulhe a ponta da pipeta na água destilada até uma profundidade de aproximadamente 2 mm. Solte o botão para absorver um pouco do líquido e, em seguida, libere o líquido novamente pressionando o botão. Repita esta etapa três vezes para lavar as pontas do conta-gotas antes de usar.
Pressione o botão até o segundo limite para remover o líquido restante na ponta da pipeta e, em seguida, retire a pipeta da água
Etapa 6. Absorva o volume de calibração
Com a ponta da pipeta posicionada fora da água destilada, pressione o botão até o primeiro limite. Mergulhe a ponta da pipeta 2 mm em água destilada e solte o botão para sugar o líquido para a ponta da pipeta. Espere cerca de 1 segundo antes de remover o conta-gotas da água.
Certifique-se de que a ponta da pipeta está totalmente submersa durante o processo de aspiração. Não deve haver bolhas na ponta do conta-gotas ou o resultado pode estar errado
Etapa 7. Despeje o líquido no prato de pesagem da balança
Coloque a ponta da pipeta no fundo do copo de pesagem e pressione o botão da pipeta até o primeiro limite. Vá para outro ponto, um pouco afastado da água, e pressione o botão até o segundo limite. Mantendo o botão pressionado, levante a ponta da pipeta do copo de pesagem.
Mantenha a ponta conectada à pipeta, pois você a usará novamente para alguns outros testes de calibração
Etapa 8. Registre o peso mostrado na balança
Feche a porta da cabine de balança se estiver usando uma balança de porta. Espere até que os números não mudem mais. Escreva no seu caderno.
É importante esperar até que os números na escala não mudem novamente antes de anotá-los. As notas darão errado se você não esperar
Etapa 9. Repita este processo para realizar a leitura pelo menos 10 vezes
Zere a balança novamente, lave as pontas da pipeta antes de usar, aspire o mesmo volume de líquido, remova o volume e registre o peso. Registre o peso da água destilada para o mesmo volume e faça a média de todas as suas notas.
Você pode repetir esse processo para volumes diferentes se cada volume for testado várias vezes
Parte 2 de 2: Calculando o Resultado da Calibração
Etapa 1. Defina a fórmula para o volume calculado
A fórmula para calcular o volume de líquido ejetado pela pipeta é V = w * Z, w é o peso da água, Z é o fator de conversão baseado na densidade da água, enquanto V é o volume da quantidade de água removido.
- A variável Z pode ser obtida calculando a densidade da água usando a temperatura registrada no início do experimento.
- Por exemplo: Se a temperatura da água for 23 ° C, o valor Z é 1,0035 g / mg.
Etapa 2. Calcule a média geral das calibrações da pipeta
O volume de água liberado pela pipeta foi pesado pelo menos dez vezes. Para calcular a média de todos esses valores, some-os e divida por 10. Se você fez mais ou menos parte do processo, some os resultados gerais e divida pelo número de tentativas realizadas.
- Por exemplo: O peso da água das 10 experiências realizadas com a pipeta de 10 µL é o seguinte: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 e 9, 98.
- A média é: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98) / 10 = 99, 84/10 = 9.984
Etapa 3. Insira as variáveis na equação e resolva
Depois de determinar o número correto para cada variável, insira-o na fórmula e complete o volume calculado. Para resolver esta equação, basta multiplicar o peso médio de todas as tentativas pelo valor Z.
Por exemplo: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10.019
Etapa 4. Calcule a precisão da pipeta
Use a equação A = 100 x Vmédia/ V0 para calcular a precisão da pipeta. A indica a precisão da pipeta, Vmédia é o volume médio calculado, e V0 é o valor definido na pipeta. O valor de precisão deve estar entre 99-101%.
- Se a pipeta estiver devidamente calibrada, o valor calculado deve ser muito próximo do valor real definido na pipeta.
- Por exemplo: A = 100 x Vmédia/ V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
- Esta pipeta está devidamente calibrada.
Etapa 5. Se necessário, envie a pipeta para calibração
Se sua pipeta não passar no teste de calibração, não a use para experimentação agora. As pipetas são equipamentos de laboratório muito frágeis e caros. Você não pode consertar a calibração sozinho, a pipeta deve ser enviada para conserto. Como alternativa, várias empresas irão ao seu laboratório e calibrarão a pipeta no local.
